以下是有关DNA粗提取实验的阅读材料:
A.核酸极不稳定,在较为剧烈的化学、物理因素和酶的作用下很容易降解。在制备DNA时要加入DNA酶(水解DNA的酶)的抑制剂——柠檬酸钠,以除去Mg,防止DNA酶的激活。
B.核酸中的DNA和RNA在生物体内均以核蛋白(由核酸和蛋白质组成)的形式存在,DNA核蛋白在2mol/L的NaCl溶液中溶解度很高,但在0.14mol/L的NaCl溶液中的溶解度很低;而RNA核蛋白易溶于0.14mol/L的NaCl溶液。
C.用苯酚处理,可使蛋白质变性,且留在苯酚层内;在DNA溶液中加入2.5倍体积分数为95%的酒精,可将DNA分离出来。此时DNA十分黏稠,可用玻璃棒搅成团取出。
D.DNA在强酸环境下,水解产生脱氧核糖等小分子物质,它与二苯胺酸性溶液反应,能生成蓝色化合物。
E.实验材料与仪器:柠檬酸钠溶液、石英砂、0.14mol/L的NaCl溶液、2mol/L的NaCl溶液、蒸馏水、苯酚、体积分数为95%的酒精、二苯胺试剂、浓硫酸、花椰菜、研钵、烧杯、漏斗、玻璃棒、量筒、石棉网、酒精灯、吸管、试管等。
F.实验步骤:研磨得匀浆→过滤得滤液→滤液稀释6倍→离心处理得沉淀物→沉淀物再溶解→加苯酚静置后去上层清液→提取出DNA→DNA鉴定。
请阅读以上材料完成下列问题:
(1)研磨时,取10g花椰菜,加适量的石英砂和___________、____________。
(2)将滤液稀释6倍,其目的是_______________。
(3)取沉淀物,置于2mL2mol/L的NaCl溶液中,使DNA核蛋白再次溶解,再加2mL苯酚充分振荡后静置,待其分层后,弃去上层的苯酚。该步骤的目的是除去______________。
(4)如何将剩余溶液中的DNA提取出来?
(5)如何证明提取的物质确实是DNA? 题型:实验题难度:中档来源:期末题
答案:
(1)2mol/L的NaCl溶液 柠檬酸钠溶液
(2)使DNA的溶解度降低
(3)蛋白质
(4)向下层DNA溶液中加入2.5倍体积分数为95%的酒精,再用玻璃棒搅拌,在玻璃棒上的丝状物为DNA
(5)将提取物与二苯胺混合后水浴加热,若溶液呈蓝色则为DNA
以下是有关DNA粗提取实验的阅读材料:A.核酸极不稳定,在较为剧烈的化学、物理因素和酶的作用下很容易降解。在制备DNA时要加入DNA酶(水解DNA的酶)的抑制剂——柠檬酸钠,以除去-高二生物
时间:2020-04-17
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